Оберіть свою мову

Телефонний довідник

 
 

GoogleTranslate

Ukrainian Bulgarian Czech Danish English Estonian Finnish French German Greek Hungarian Italian Japanese Latvian Lithuanian Norwegian Polish Portuguese Romanian Slovak Slovenian Spanish Turkish
 

Шановні колеги, вітаю Вас! Після літніх відпусток - 2016 науковий семінар Інституту біохімії ім. О.В.Палладіна НАН України «Актуальні проблеми сучасної біохімії» продовжує свою роботу. 4-го жовтня 2016 р. (вівторок) о 10-30 в Актовій залі Інституту будемо слухати доповідь аспіранта 3-го року навчання ННЦ «Інститут біології» Київського національного університету імені Тараса Шевченка, провідного інженера відділу молекулярної біології Інституту біохімії ім. О.В. Палладіна НАН України Кривдюк Ірини Володимирівни. Тема доповіді: «ERN1-залежна регуляція експресії генів родин GADD та TNF рецепторів у клітинах гліоми». Авторські тези доповіді, як завжди, додаються. Запрошуємо Вас та Ваших колег до участі у роботі нашого семінару.

З повагою – С.О.Костерін.

ERN1-залежна регуляція експресії генів родин GADD та TNF рецепторів у клітинах гліоми

Апробація дисертаційної роботи на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук зі спеціальності 03.00.04 – біохімія

Доповідач: Кривдюк Ірина Володимирівна, аспірант 3-го року навчання ННЦ «Інститут біології» Київського національного університету імені Тараса Шевченка, провідний інженер відділу молекулярної біології Інституту біохімії ім. О.В. Палладіна НАН України

Науковий керівник: Мінченко Олександр Григорович, доктор біологічних наук, професор

Актуальність теми. Гіпоксія, нестача поживних речовин, окисний стрес та інші метаболічні порушення, які характерні для пухлинних клітин, є індукторами захисних клітинних механізмів, зокрема відповіді на незгорнуті протеїни (UPR), що називається стресом ендоплазматичного ретикулума (ЕР). Залежно від тривалості і ступеня стресу ЕР, відповідь на незгорнуті протеїни може сприяти виживанню клітин, активуючи адаптивні та антиапоптозні шляхи, або ж викликати загибель клітин, активуючи програми клітинної смерті.

Для пухлинних клітин надзвичайно важливою є адаптивна гілка UPR, яка дозволяє їм виживати у несприятливому мікрооточенні, і це може використовуватись для розробки способів протипухлинної терапії. Однак, ще не встановлено який внесок здійснює кожна з гілок стресу ЕР у злоякісну трансформацію клітин, як різні стрес-ЕР-індукуючі умови впливають на механізми UPR та як відбувається інтеграція UPR з іншими сигнальними шляхами. Відомо, що інгібування ERN1-залежного шляху стресу ЕР пригнічує ріст пухлин.

Дослідження експресії генів родин GADD та рецепторів TNF у клітинах гліоми за умов виключення однієї з гілок UPR та за різних умов середовища (гіпоксії та нестачі поживних речовин) є актуальним, оскільки розкриває механізми взаємодії UPR із сигнальними шляхами цих генів-супресорів пухлинного росту та факторами зовнішнього оточення і сприятиме розробці програм лікування пухлин в залежності від стану активації UPR-пов'язаних сигнальних мереж.

Мета: встановити можливу участь генів родини GADD, а також генів рецепторів TNF та протеїнів, залучених у передачу сигналів від них, у ERN1-залежному рості злоякісних пухлин шляхом дослідження їх експресії у клітинах гліоми лінії U87 за умов повного або часткового пригнічення функції ERN1, основного сенсорно-сигнального ензиму стресу ЕР, а також за гіпоксії та дефіциту глутаміну або глюкози.

Задачі:

1. Вивчити рівень експресії мРНК представників родини GADD, а також рецепторів TNF та протеїнів, залучених у передачу сигналів від них, у клітинах гліоми лінії U87 з пригніченою активністю ензиму ERN1.

2. Дослідити вплив пригнічення ендорибонуклеазної активності ERN1 на експресію генів родини GADD, а також генів рецепторів TNF та протеїнів, залучених у передачу сигналів від них,у клітинах гліоми лінії U87.

3. Вивчити рівень експресії мРНК представників родини GADD, а також рецепторів TNF та протеїнів, залучених у передачу сигналів від них, у клітинах гліоми лінії U87 за умов гіпоксії в залежності від активності сигнального ензиму ERN1.

4. Дослідити вплив дефіциту глутаміну та глюкози на експресію мРНК представників родини GADD, а також рецепторів TNF та протеїнів, залучених у передачу сигналів від них, у клітинах гліоми лінії U87 за умов пригнічення функції ензиму ERN1.

Результати. Показано, що експресія генів родин GADD та TNF рецепторів, а також протеїнів, залучених у передачу сигналів від них, у клітинах гліоми лінії U87 залежить від функціональної активності ERN1, причому виявлені зміни в експресії досліджених генів корелюють зі зменшенням інтенсивності проліферації клітин з пригніченою активністю ERN1. Встановлено, що зміни в експресії генів GADD34, GADD45β, TNFRSF10D,TNFRSF21, RYBP та TNIP1 у клітинах гліоми за умови пригнічення ERN1 обумовлені виключенням саме кіназної активності цього ензиму, генів SESN1, GADD45α та BRE – виключенням ендорибонуклеазної активності ERN1, а генів GADD153, TNFRSF1А, TNFRSF10B, TNFRSF11В та FADD – обох його активностей. Показано також, що гіпоксія по-різному змінює рівень експресії досліджених генів, а пригнічення функції ERN1 модифікує ефекти гіпоксії на експресію більшості цих генів. Крім того, встановлено, що рівень експресії частини досліджених генів змінюється за умов дефіциту глутаміну і глюкози і що ці ефекти здебільшого залежать від функціональної активності ERN1. Одержані результати розкривають молекулярні механізми участі генів родини GADD та TNF рецепторів, а також протеїнів, залучених у передачу сигналів від них, у процесах проліферації клітин та механізми взаємодії гіпоксії та ішемічних чинників із ERN1, основним сенсорно-сигнальним ензимом стресу ЕР.

Що виноситься на захист. Зміни в експресії генів родин GADD та TNF рецепторів, а також протеїнів, залучених у передачу сигналів від них, у клітинах гліоми лінії U87 залежать від функціональної активності ERN1, основного сенсорно-сигнального ензиму стресу ЕР, що свідчить про участь цих генів у зниженні інтенсивності проліферації клітин гліоми з пригніченою активністю ERN1.