Шановні колеги, день добрий! В Інституті біохімії ім. О.В.Палладіна
НАН України продовжує свою роботу НАУКОВИЙ СЕМІНАР. 5-го жовтня (ВІВТОРОК) о 10-30 ранку будемо слухати доповідь Редчука Тараса Анатолійовича "Рекомбінантні антигени MPT63 та MPT83 для імунодіагностики туберкульозу" (відділ молекулярної ымунології ІБХ НАНУ). Доповідь буде зроблено за матеріалами кандидатської дисертації, яку підготовлено до захисту. Науковий керівник – академік НАН та АМН України С.В.Комісаренко. Традиційно авторські тези доповіді маєте у файлі, що додається. Запрошуємо Вас до участі у роботі нашого семінару.
З повагою - С.О.Костерін.
Редчук Тарас Анатолійович
Рекомбінантні антигени MPT63 та MPT83 для імунодіагностики туберкульозу.
Апробація дисертаційної роботи на здобуття наукового ступеня
кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.20 – біотехнологія
Науковий керівник:
д.б.н., проф., акад. НАН та АМН України Комісаренко Сергій Васильович
Туберкульоз – небезпечне інфекційне захворювання, спричинене інфекцією Mycobacterium tuberculosis, що вбиває більше 2 мільйонів людей щорічно. Туберкульоз великої рогатої худоби (ВРХ), збудником якого є близький вид M.bovis, призводить до значних фінансових збитків та являє загрозу в зв’язку з можливістю передачі інфекції від ВРХ до людини. Однією з причин ускладнення епідеміологічної та епізоотологічної ситуації, що спостерігається, є недосконалість системи діагностування мікобактеріальних інфекцій.
Представлена робота присвячена вивченню властивостей рекомбінантних аналогів антигенів мікобактерій MPT63 та MPT83 з метою їх подальшого використання при розробці тест-систем для імунодіагностики туберкульозу. Обрані мікобактеріальні антигени, завдяки особливостям транспорту, часто викликають імунну відповідь у інфікованому організмі, характеризуються високим рівнем експресії та є притаманними лише представникам M.tuberculosis complex, що робить їх перспективними кандидатами для M.tuberculosis complex специфічної диференціальної діагностики.
В ході роботи нами одержано рекомбінантні аналоги антигенів MPT63 та MPT83 M.bovis та розроблено ефективну схему їх виділення методом металоафінної хроматографії.
Розроблено схему для визначення туберкульозу ВРХ на рівні стад на основі імуноферментного аналізу з використанням рекомбінантних аналогів антигенів MPT63 та MPT83.
Розроблено прототип тест-системи для напівкількісної оцінки рівня антитіл проти антигенів Mycobacterium tuberculosis MPT63 та MPT83 з використанням імунних сироваток кролів та апробовано імунохроматографічний підхід до визначення рівня антитіл до антигенів збудника туберкульозу MPT63 та MPT83 на зразках сироваток крові корів.
Створено злитий білок MPT63-MPT83 та доведено його переваги порівняно з окремими MPT63 та MPT83 при використанні у імуноферментному аналізі, продемонстровано відповідність антигенних властивостей химерного протеїну MPT63-MPT83 до рекомбінантних попередників та нативних MPT63 та MPT83. Виявлено значний рівень відповіді у ІФА на химерний білок MPT63-MPT83 у ВРХ, інфікованої M.bovis, та відсутність перехресних реакцій з антитілами сироваток тварин, інфікованих непатогенними мікобактеріями M. intracellulare, M. scrofulaceum, M. fortuitum та тварин, імунізованих M.bovis BCG.
Таким чином, в роботі досліджено важливі імунобіологічні властивості одержаних рекомбінантних аналогів антигенів збудника туберкульозу MPT63, MPT83 та химерного білка MPT63-MPT83. Отримані дані дозволили запропонувати прототипи тест-систем для діагностики туберкульозу великої рогатої худоби на основі методів імунохроматографії та імуноферментного аналізу.