Протоковий цитофлуориметр DxFLEX
Призначення приладу
Протоковий цитофлуориметр DxFLEX є системою для якісного і кількісного визначення біологічних і фізичних властивостей клітин та інших часток. Він призначений для швидкого аналізу поверхневих та внутрішньоклітинних антигенів (маркерів) клітин за допомогою методу імунофлюоресценції, що дозволяє чітко диференціювати клітини за походженням та отримувати дані про популяційний склад досліджуваного зразка біоматеріалу.. За допомогою цитофлуориметра можна одночасно вимірювати такі параметри, як: пряме розсіювання, бокове розсіювання та інтенсивність флуоресценції на 5 довжинах хвиль (525, 585, 610, 690 та 780 нм), використовуючи лазер, що випромінює на довжині хвилі 488 нм. Тому прилад може проводити кореляційний багатопараметричний аналіз окремих клітин. За допомогою приладу можна досліджувати такі біологічні об'єкти, як клітини людини, тварин, рослин, морський планктон, бактерії та інш.
Вимоги до зразків: об'єм не менше 0,5 мл; однорідна суспензія клітин; оптимальна щільність 5x106 клітин/мл; розмір клітин від 0,5 до 40 мкм. Формати пробірок для подавання зразків: 5 мл (12х75 мм) поліпропіленові або полістиролові пробірки; 1,5 мл та 2 мл мікроцентрифужні пробірки.
Таблиця №1
Галузі застосування приладу і параметри, що можна визначати для різних типів клітин
|
№ |
Галузь застосування |
Типи клітин, що досліджуються |
Реактиви і обладнання, необхідне для приготування зразків |
Результати вимірювань |
Параметри, що визначає прилад |
|
1 |
Дослідження поверхневих антигенів клітин |
Цільна кров, клітини світлого краю кров'яного згустку, мононуклеарні клітини, гомогенати тканин, тромбоцити, клітини кісткового мозку |
Реагенти ImmunoPrepTM, Q-PREPTM Workstation, реагенти для лізису цільної крові, фікол, антитіла з флуоресцентними мітками |
Розмір і гранулярність клітин. Кількість зв'язаних з клітинами флуоресцентних барвників (FITC, RD1, ECD, PC5) |
В логаріфмічному і лінійному масштабі пряме і бокове розсіювання, флуоресценція на 4 довжинах хвиль. Відсоток клітин позитивних чи негативних по 4 сигналам (Prism) Співвідношення двох сигналів (Ratio) Час визначення пікового сигналу (AUX) |
|
2 |
Дослідження нуклеїнових кислот |
Цільна кров, гомогенати тканин, заморожені зрізи, парафінові зрізи, біологічні рідини |
Етидіум бромід, пропідіум йодид, інші реагенти для забарвлення ДНК (DNA Prep) |
Розмір і гранулярність клітин, інтенсивність зеленої, червоної та оранжевої флуоресценції барвників |
Пряме і бокове розсіювання. В логаріфмічному і лінійному масштабі флуоресценція на 4 довжинах хвиль. Співвідношення двох сигналів AUX |
|
3 |
Кінетичні дослідження |
Цільна кров, клітини світлого краю кров'яного згустку, мононуклеарні клітини, клітини культури тканин |
Флуоресцентні зонди (наприклад, Fluo 3) |
Розмір і гранулярність клітин. Інтенсивність зеленої флуоресценції зонда в часі |
Пряме і бокове розсіювання |
|
4 |
Вивчення функцій клітин |
Цільна кров, клітини світлого краю кров'яного згустку, мононуклеарні клітини, клітини культури тканин |
Різноманітні барвники |
Розмір і гранулярність клітин. Інтенсивність зеленої флуоресценції |
Пряме і бокове розсіювання |
|
5 |
Дослідження ретикулоцитів |
Цільна кров |
Тіазол-оранж коріфосфін О (CPO) |
Розмір і гранулярність клітин |
В логаріфмічному і лінійному масштабі прямее і бокове розсіювання. В логаріфмічному масштабі флуоресценція на 2 довжинах хвиль (FL1 та FL4) |
Технічні характеристики цитофлуориметра DxFLEX
Довжина – 42,5 см
Ширина – 42,5 см
висота – 34 см
Вага – 23,4 кг
Потокова комірка
Запатентована конструкція кварцевої проточної кювети без попереднього фокусування з інтегрованою оптикою з внутрішнім діаметром 430x180 μm.
Швидкість потоку
передустановки швидкості – 10, 30 та 60 мкл/хв ;
Лазер
Аргоновий лазер, випромінює на довжині хвилі 488 нм, потужність 50 мВт, розмір пучка 5х80 μм.
Роздільна здатність
За бічним світлорозсіянням < 300нм
Чутливість:
FITC: ≤ 30 молекул еквіваленту розчинного флюорохрому;
PE: ≤ 10 молекул еквіваленту розчинного флюорохрому.
Реєстрація подій
До 30 000 подій в секунду за 10 параметрами
Робоча програма
CytExpert Software – безкоштовне програмне забезпечення можна встановити на будь-який комп'ютер для обробки й аналізу даних.
Формат даних
FCS 3.0, який дозволяє проводити компенсацію зразків off-line.